1.1.5 煮沸
①特点：煮沸 10~20min 可杀死所有细菌繁殖体，芽孢常需煮沸 1~3h才被杀死。若水中加入 2%的 Na2CO3或石炭酸，可提高沸点至 105℃，既可加速芽孢的死亡，又能防止金属器械生锈
猪栏，1 栏换 1 个针头→防止感染
②适用范围：手术器械，注射器，针头及食具等。
影响因素：海拔高度
1.1.6 流通蒸汽消毒法
①特点：101.3kPa（1 个大气压）100℃（气浴），15~30min可杀死细菌的繁殖体，但不能杀死芽孢和孢子。
②适用范围：常用于不耐高温的营养物品，如含糖或含血清培养基灭菌
1.1.7 流通蒸汽灭菌法
①特点：利用流通蒸汽杀灭细菌繁殖体和保温促芽孢出芽交替进行，达到完全灭菌目的。
②方法：100℃维持 30min，37℃温箱过夜，连续进行 3 次灭菌和 2 次保温不耐高温的培养基的，70~80℃维持 1h，37℃温箱过夜，连续进行 3 次灭菌和 2 次保温。
③适用范围：用于不耐高温的培养基灭菌
1.1.8 高压蒸汽灭菌法
①特点：利用高压蒸汽灭菌器进行的灭菌方法→应用最广、最有效的灭菌方法
②方法：常用 103.4kPa 的压力，在 121.3℃温度下维持15~20min 即可杀死所有微生物，达到完全灭菌目的实验室必须做的→加蒸馏水→自来水含氯腐蚀电子控件。
③适用范围：耐高温，不怕潮湿，物品的灭菌，如培养基，溶液，器皿器械，工作服的实验动物尸体等灭菌。
④注意事项：
（1）灭菌不宜过大，过紧，灭菌器内物品放着含量不应超过灭菌器柜容积的 85%。
（2）盛装物品的容器应有孔，若无，孔应将容器盖打开。
（3）布类物品放在金属，糖瓷类物品上。
（4）灭菌锅密闭前，应将冷空气充分排空（一直强调）
（5）随时观察压力及温度情况 十五轮回周
（6）注意安全操作，每次灭菌前，应检查灭菌器。
（7）灭菌完毕后减压不要过猛，压力表回归，“0”位后才可打开盖或门。
（8）被灭菌物品应待干燥后才能取出各用。
⑤在同一温度条件湿热灭菌比干热灭菌效力大。
原因：
（1）热蒸汽对细胞成分的破坏更强小分子的存在有助于破坏维持蛋白质二维结构的氢键和其它相互作用弱键，更易使蛋白质变性。蛋白质含水量与其凝固温度成反比。
（2）热蒸汽比热空气穿透力强能更加有效地杀灭微生物。
（3）蒸汽存在潜热
当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体的温度。
2.辐射灭菌法
?电离辐射：
放射性同位素射线αβγ
X 射线等
非电离辐射
可见光，日光
紫外线，红外线
微波等
2.1 可见光
①指在红外线和紫外线之间，肉眼可见的光线，波长 100~800nm，可见光只有微弱的杀菌作用。
②光感作用：染料加到培养基或涂在外伤表面，增强可见光杀菌作用的现象。
2.2 阳光
直射日光有强烈的杀菌作用，是天然杀菌因素，紫外线是日光杀菌作用主要因素。
2.3 紫外线杀菌
①波长 200~300nm 的紫外线有杀菌作用，其中以 265~266nm 最强。
②杀菌机制：使同一条 DNA 链上相邻的胸腺嘧啶（T）生产共价键形成二聚体，干扰 DNA 的复制与转录。
③杀菌特点：穿透力弱，只是表面消毒
④适用范围：手术室，传染病房，细菌实验室的空气消毒或不耐热物品表面消毒。
⑤光复活作用 →光裂解酶
2.4 电离辐射
①又称冷消毒，冷灭菌。是利用放射性同位素的射线或电子辐射，穿透物品，杀死一切微生物的方法。
②特点：
（1）X 射线不如紫外线，作用慢。波长愈短，杀菌能力愈强。
小主，
（2）αβ射线电离电离辐射作用强，γ射线较弱。
（3）βγ射线穿透力强
③主要应用于灭菌的射线有 X 射线，β射线，γ射线。
④机制：产生游离 H+和 OH-，其为强烈还原剂和氧化剂，直接作用细菌本身，导致包括 DNA 在内的细胞内部物质分解，使细菌死亡或发生突变。
⑤优点：
（1）穿透力强，消毒均匀彻底，效果可靠，不受包装形式限制。
（2）不会使物品升温，适用于不耐热物品灭菌。
（3）节省能源
⑥缺点：一次性投资大，还需经过特殊训练的专门技术人员进行管理。
⑦应用范围：精密医疗器械，一次性医疗用品（注射器、输液器、输血器等）药物，食品，工业产品，生物医学制品等。
2.5 微波
①特点：从几百兆 Hz 至几十万兆 Hz 频率的无线电波称为微波。
②方法：主要是利用微波的加热作用完成灭菌且必须在一定含水量条件下才能显示出来，需时短，加热均匀。
③用途：可用于非金属医药用品等的灭菌加热金属时会产生火花击穿配件。
3.干燥和渗透压
①特点：微生物在失去大量水分时，新陈代谢障碍，菌体蛋白质变性，逐渐死亡。
②用途：用干燥法来保存食品，饲料，谷类，皮张，药材等
利用高浓度的盐水或糖水保存食品
③方法：干燥法创造干燥环境
高渗溶液吸收菌体水分，造成生理干燥而抑菌
4.滤过除菌
①概念：通过机械阻留作用将液体或空气中细菌等微生物除去的方法。
②用途：
（1）液体培养基和药物除菌
（2）病毒液分离除菌
（3）空气净化除菌
③注意事项
超速离心才能过滤病毒